一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠骨髓肥大细胞（Rat Bone Marrow Mast Cells）
- 细胞别称：BMMC；骨髓源性肥大细胞；肥大细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无免疫系统疾病史）
- 组织来源：骨髓组织（经密度梯度离心分离纯化）
- 生长特性：悬浮或贴壁混合生长（依赖细胞因子及培养条件）
- 细胞形态：圆形或椭圆形，胞质内含特征性异染颗粒
- 细胞代数：P2 - P6（推荐使用代数以确保颗粒稳定性和脱颗粒功能）
- 细胞规格：1×10^6 cells/冻存管（含无血清冻存液）或5×10^5 cells/T25培养瓶
- 培养基：肥大细胞专用培养基（含10% FBS+IL - 3+SCF生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含12% DMSO及海藻糖保护剂），-150℃以下长期保存
- 增殖能力：依赖细胞因子浓度，通常每5 - 7天扩增1.5 - 2倍
- 供应限制：仅限体外研究使用，不可用于体内实验或治疗用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基，接种于纤连蛋白包被培养瓶
- 培养瓶：直接置于培养箱静置4小时，避免震动
- 传代标准：细胞密度达1×10^6 cells/mL（悬浮培养）或80%融合（贴壁培养）
- 传代方法
- 贴壁细胞：0.02% EDTA轻柔解离，避免破坏颗粒完整性
- 悬浮细胞：直接离心收集，按比例稀释接种
- 注意事项
- 维持IL - 3（10ng/mL）和SCF（20ng/mL）浓度以保持细胞活性
- 定期检测组胺释放能力（建议每代次进行钙离子载体刺激验证）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含12% DMSO+10%海藻糖+基础培养基）
- 冻存密度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存流程
- 离心收集细胞，轻柔重悬于预冷冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：β - 氨基己糖苷酶释放实验（P3代细胞脱颗粒率应＞40%）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞活性＜80%（需提供物流温度记录）
- 7日内经ELISA检测证实细胞因子响应缺失（需提供实验数据）
- 颗粒染色（甲苯胺蓝）显示颗粒完整性丧失＞50%
- 遗传背景与大鼠品系不符（需提供STR检测报告）
- 免责条款
- 未使用指定细胞因子导致脱颗粒功能异常
- 离心速度＞300g造成颗粒破裂
- 未按时更换培养基引发自发脱颗粒
- 实验操作中接触IgE/抗原导致提前活化
