一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠淋巴管成纤维细胞(Rat Lymphatic Fibroblasts)
- 细胞别称:RLF;淋巴管内皮成纤维细胞;淋巴基质细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别均一化提供,无菌环境繁育)
- 组织来源:淋巴管组织(经胶原酶消化分离纯化)
- 生长特性:贴壁生长(需明胶包被培养器皿)
- 细胞形态:典型长梭形或多极伸展状,融合后呈网状排列
- 细胞代数:P3 - P10(经STR鉴定确认遗传稳定性)
- 细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:DMEM/F12+10% FBS+1%成纤维细胞生长因子补充剂
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:饱和湿度
- 冻存条件:无血清冻存液(含5% DMSO及低温保护剂),液氮气相长期保存
- 倍增时间:约36 - 48小时(与培养密度及血清批次相关)
- 供应限制:仅用于基础研究,禁止转售或生物医药衍生品开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴轻摇解冻,离心后重悬于预热培养基;培养瓶:酒精消毒外表面,静置4小时后全量换液
- 传代标准:细胞密度达80% - 90%(接触抑制明显时操作)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰蛋白酶+0.02% EDTA溶液,37℃消化3 - 5分钟,离心后轻柔吹散细胞团块
- 注意事项:避免频繁观察扰动细胞贴壁过程;传代后6小时内禁止移动培养器皿
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础培养基+20% FBS+5% DMSO
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:预冷冻存管至4℃,细胞悬液分装后立即程序降温,梯度冷冻:4℃ 30分钟 → - 80℃ 过夜 → 液氮储存
- 复苏验证:复苏后存活率≥85%(AO/PI双染法检测),功能验证:α - SMA免疫荧光染色确认肌成纤维特性
四、售后服务承诺
- 重发标准:1.到货干冰耗尽或温度记录> - 130℃(需提供物流记录);2.72小时内经qPCR证实交叉污染(需提供电泳图谱);3.细胞增殖速度偏离技术文档30%以上(需提供生长曲线)
- 不予重发情形:1.未使用指定包被材料导致贴壁失败;2.擅自添加细胞因子改变培养体系;3.超过建议传代次数引发的功能衰退;4.未执行推荐的支原体预防方案