一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠淋巴管内皮细胞（Rat Lymphatic Endothelial Cells）
- 细胞别称：RLEC；淋巴管内皮细胞；毛细淋巴管内皮细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无淋巴系统疾病史）
- 组织来源：胸导管或肠系膜淋巴管
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤连蛋白包被基质）
- 细胞形态：单层铺展后呈梭形或多边形，可形成管状网络结构
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能稳定性与低传代变异风险）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：淋巴内皮细胞专用培养基（含2% FBS + VEGF - C及EGF生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 72小时（依赖生长因子浓度及基质包被条件）
- 供应限制：仅限体外研究使用，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置于培养箱内2小时平衡温湿度。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每3 - 4天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.05%胰酶-EDTA（不含Ca²⁺/Mg²⁺）。
- 37℃消化1 - 2分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止反应。
- 注意事项：
- 避免消化时间过长（防止细胞间连接蛋白降解）。
- 首次换液需在传代后6 - 8小时进行，以去除残留消化液。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液。
- 梯度降温程序：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证：
- 复苏后24小时内进行台盼蓝染色检测存活率（标准≥90%）。
- 功能验证：管形成实验（P5代细胞应维持成管能力）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度记录异常导致细胞死亡（需提供物流温度监控报告）。
- 到货3天内证实微生物污染（需提供PCR或培养检测结果）。
- 复苏后细胞存活率低于85%（台盼蓝染色法确认）。
- 物种鉴定结果与标注不符。
- 不予重发情形：
- 客户未按规范储存（如冻存管未及时转移至液氮）。
- 使用非配套培养基或未进行基质包被。
- 实验操作不当导致细胞污染或损伤。
- 未定期进行支原体检测或未保留细胞冻存备份。
