一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠内皮祖细胞(Rat Endothelial Progenitor Cells)
- 细胞别称:REPC;内皮祖细胞;血管内皮前体细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无特定疾病史)
- 组织来源:骨髓或外周血(经密度梯度离心法分离)
- 生长特性:贴壁生长(依赖纤维连接蛋白包被培养皿)
- 细胞形态:纺锤形或多角形,高增殖活性时可呈现集落样聚集
- 细胞代数:P3 - P8(确保干细胞特性及分化潜能稳定)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Endothelial Growth Medium - 2(含5% FBS+血管内皮生长因子VEGF)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~36 - 48小时(与培养条件及细胞活性密切相关)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入预热培养基离心去除冻存液后重悬接种
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱1小时恢复
- 传代标准:细胞融合度达70% - 80%(避免过度融合影响增殖能力)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺平衡液)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻柔吹打至细胞脱离基质
- 注意事项:
- 传代后需添加5 ng/mL bFGF维持干性
- 避免频繁换液(建议每48小时更换50%培养基)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期存储
- 复苏验证:
- 复苏后12小时检测细胞贴壁率(≥85%为合格)
- 功能验证:CD34/CD133流式检测(P5代细胞阳性率≥90%)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度记录异常(需提供物流温度监控截图)
- 到货7天内证实支原体污染(需提供第三方检测报告)
- 流式鉴定标记物表达率低于承诺值(误差>10%)
- 不予重发情形:
- 未按推荐冻存条件导致细胞活性丧失
- 自行修饰细胞基因后出现功能异常
- 接种密度过低导致增殖停滞
- 未使用配套培养基影响检测结果
(注:所有操作需符合生物安全规范,实验废弃物需经灭菌处理。)