一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠骨髓源性树突状细胞(Rat Bone Marrow - Derived Dendritic Cells)
细胞别称:rBMDC;大鼠DC细胞;树突状细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成体(性别随机,SPF级动物来源)
组织来源:股骨/胫骨骨髓腔单核细胞诱导分化
生长特性:半贴壁生长(培养初期悬浮,成熟后轻微贴壁)
细胞形态:成熟态呈典型树突状突起,未成熟态为类圆形
细胞代数:原代培养(无传代操作,直接使用第7 - 10天分化细胞)
细胞规格:5×10^5 cells/冻存管(含专用冻存液)
培养基:RPMI - 1640 + 10% FBS + 20ng/mL GM - CSF + 10ng/mL IL - 4
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清程序冻存液(含7.5% DMSO),液氮气相长期保存
成熟标志:CD11c+/MHC II+双阳性率≥85%(流式验证)
供应限制:仅限体外研究,不可用于体内回输或治疗实验
二、细胞培养操作指南
原代制备流程:
·骨髓冲洗:无菌取股骨骨髓腔细胞,红细胞裂解后收集单核细胞
·诱导分化:以2×10^5 cells/mL密度接种,每3天半量换液补充细胞因子
成熟诱导:
·第7天加入LPS(100ng/mL)或TNF - α(20ng/mL)刺激24 - 48小时
·收获前6小时加入荧光标记抗体进行功能示踪
注意事项:
·严格维持细胞密度≤1×10^6 cells/mL
·避免反复离心(推荐静置沉降法换液)
·成熟细胞需在刺激后72小时内使用
三、细胞冻存操作规范
冻存时机:分化第7天未成熟期或第10天成熟期
冻存液配方:无血清冻存液(含7.5% DMSO+1% HSA)
冻存密度:5×10^6 cells/mL(每管1mL)
程序降温:
·4℃平衡30分钟
·-80℃冷冻盒梯度降温(-1℃/min)
·24小时后转入液氮长期保存
复苏要点:
·37℃水浴快速解冻(≤2分钟)
·预温培养基1:10缓慢稀释
·静置培养4小时后再换液
四、售后服务承诺
技术支持:
·提供成熟诱导方案及共培养体系构建指南
·免费索取3种特异性标志物检测方案(CD86/CD80/OX62)
质保条款:
·到货48小时内报告污染或活性<80%免费补发
·功能不达标提供等量细胞或技术指导
免责声明:
·未按操作规范进行TLR配体刺激导致的低活性
·自行添加非推荐细胞因子引起的表型改变
·解冻后培养超过12小时再使用的功能衰减
本产品符合国际细胞治疗协会ISCT标准,实验数据可溯源至ATCC技术指南