大鼠DC细胞

大鼠原代细胞

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XM-X03051×10^6大鼠原代细胞5750


一、细胞基本属性

细胞名称:大鼠骨髓源性树突状细胞(Rat Bone Marrow - Derived Dendritic Cells)

细胞别称:rBMDC;大鼠DC细胞;树突状细胞

种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)

年龄性别:健康成体(性别随机,SPF级动物来源)

组织来源:股骨/胫骨骨髓腔单核细胞诱导分化

生长特性:半贴壁生长(培养初期悬浮,成熟后轻微贴壁)

细胞形态:成熟态呈典型树突状突起,未成熟态为类圆形

细胞代数:原代培养(无传代操作,直接使用第7 - 10天分化细胞)

细胞规格:5×10^5 cells/冻存管(含专用冻存液)

培养基:RPMI - 1640 + 10% FBS + 20ng/mL GM - CSF + 10ng/mL IL - 4

培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%

冻存条件:无血清程序冻存液(含7.5% DMSO),液氮气相长期保存

成熟标志:CD11c+/MHC II+双阳性率≥85%(流式验证)

供应限制:仅限体外研究,不可用于体内回输或治疗实验


二、细胞培养操作指南

原代制备流程:

·骨髓冲洗:无菌取股骨骨髓腔细胞,红细胞裂解后收集单核细胞

·诱导分化:以2×10^5 cells/mL密度接种,每3天半量换液补充细胞因子

成熟诱导:

·第7天加入LPS(100ng/mL)或TNF - α(20ng/mL)刺激24 - 48小时

·收获前6小时加入荧光标记抗体进行功能示踪

注意事项:

·严格维持细胞密度≤1×10^6 cells/mL

·避免反复离心(推荐静置沉降法换液)

·成熟细胞需在刺激后72小时内使用


三、细胞冻存操作规范

冻存时机:分化第7天未成熟期或第10天成熟期

冻存液配方:无血清冻存液(含7.5% DMSO+1% HSA)

冻存密度:5×10^6 cells/mL(每管1mL)

程序降温:

·4℃平衡30分钟

·-80℃冷冻盒梯度降温(-1℃/min)

·24小时后转入液氮长期保存

复苏要点:

·37℃水浴快速解冻(≤2分钟)

·预温培养基1:10缓慢稀释

·静置培养4小时后再换液


四、售后服务承诺

技术支持:

·提供成熟诱导方案及共培养体系构建指南

·免费索取3种特异性标志物检测方案(CD86/CD80/OX62)

质保条款:

·到货48小时内报告污染或活性<80%免费补发

·功能不达标提供等量细胞或技术指导

免责声明:

·未按操作规范进行TLR配体刺激导致的低活性

·自行添加非推荐细胞因子引起的表型改变

·解冻后培养超过12小时再使用的功能衰减

本产品符合国际细胞治疗协会ISCT标准,实验数据可溯源至ATCC技术指南