一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠T淋巴细胞（Rat T Lymphocytes）
- 细胞别称：T细胞；胸腺依赖性淋巴细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体无免疫缺陷病史）
- 组织来源：脾脏或淋巴结（经密度梯度离心及免疫磁珠分选纯化）
- 生长特性：悬浮生长（依赖细胞因子刺激活化）
- 细胞形态：圆形单细胞，直径6 - 8微米，表面光滑无突起
- 细胞代数：原代细胞或传代培养至P3（建议使用原代或低代次细胞）
- 细胞规格：1×10^6 cells/冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI 1640培养基（含10% FBS + 1%双抗+50 U/mL重组大鼠IL - 2）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：程序降温冻存液（含10% DMSO + 90% FBS），液氮长期保存
- 增殖能力：经ConA/PMA刺激后48 - 72小时进入指数生长期
- 供应限制：仅限体外研究，不可用于体内实验或临床用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 静置培养24小时后更换新鲜培养基去除死细胞
- 活化建议：
- 推荐使用2.5 μg/mL ConA或1 μg/mL CD3/CD28抗体刺激增殖
- 维持培养液IL - 2浓度不低于20 U/mL
- 传代标准：细胞密度达1×10^6 cells/mL或培养液明显酸化（pH<6.8）
- 传代方法：
- 离心收集细胞，按1:2比例重悬于新鲜培养基
- 每3天补充50%体积的新鲜培养基
- 注意事项：
- 避免频繁离心导致细胞机械损伤
- 活化后细胞需在7天内完成实验以保证功能稳定性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 40% FBS + 50% RPMI 1640）
- 冻存密度：推荐浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集活化后细胞，重悬于预冷冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
- 复苏验证：
- 存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：CFSE增殖检测（刺激后72小时分裂指数应≥3）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度记录异常（需提供物流温度监控截图）
- 到货48小时内证实细菌/真菌污染（需提供染色照片）
- 未活化状态下基础存活率低于80%
- 流式检测CD3+标记阳性率＜90%
- 不予重发情形：
- 未按推荐方法进行细胞活化导致功能异常
- 使用非配套刺激因子或培养基成分
- 冻存细胞未遵循程序降温直接投入液氮
- 超过建议传代次数（P3以上）导致的增殖能力下降
