一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠B淋巴细胞
细胞别称:大鼠B细胞、B淋巴母细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体无免疫系统疾病史)
组织来源:脾脏或骨髓单核细胞分离纯化
生长特性:悬浮生长(依赖细胞因子刺激)
细胞形态:圆形或类圆形,直径10 - 15微米,胞质透亮
细胞代数:原代细胞或永生化细胞系(根据客户需求注明)
细胞规格:1×10^6 cells/冻存管(含含血清冻存液)
培养基:RPMI 1640基础培养基(含10% FBS+50 μM β - 巯基乙醇+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:含血清冻存液(10% DMSO+90% FBS), - 150℃以下长期保存
倍增时间:24 - 48小时(依赖细胞活化和刺激因子)
供应限制:仅限体外研究,不可用于活体实验或商业化生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 悬浮细胞:直接转移至含5mL培养基的T25培养瓶,静置培养箱平衡
传代标准:细胞密度达1×10^6 cells/mL(悬浮培养)
传代比例:1:2至1:3(根据增殖状态调整)
换液频率:每2天补充新鲜培养基(维持葡萄糖浓度>3g/L)
注意事项:
- 避免高速离心(推荐200×g,5分钟)
- 活化建议:添加LPS(1μg/mL)或抗IgM抗体(5μg/mL)促进增殖
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:含血清冻存液(10% DMSO+90% FBS)
细胞密度:冻存浓度1×10^7 cells/mL
冻存步骤:
- 离心收集细胞,重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃平衡30分钟后转移至 - 80℃过夜,次日转入液氮
复苏验证:
- 复苏后活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:CD19表面标志物流式检测(阳性率>95%)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度失控(需提供物流温度记录)
2. 72小时内证实支原体污染(需提供检测报告)
3. 流式检测CD19阳性率<90%
4. 永生化细胞系STR鉴定不符
不予重发情形:
1. 未使用推荐活化因子导致增殖异常
2. 冻存后超过6个月未进行复苏验证
3. 实验操作污染(如未在超净台操作)
4. 未按要求进行定期支原体检测