一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠股骨头微血管内皮细胞(Rat Femoral Head Microvascular Endothelial Cells)
- 细胞别称:RFHMEC;股骨头微血管内皮细胞;骨内皮细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无股骨头病变史)
- 组织来源:股骨头微血管段
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被基质)
- 细胞形态:典型多角形单层,接触抑制后呈铺路石样排列
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能活性及遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(无血清冻存体系)
- 培养基:大鼠内皮细胞专用培养基(含5% FBS + 血管生成因子及肝素)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存(-196℃)
- 倍增时间:约48 - 60小时(与接种密度及基质相关)
- 供应限制:仅限科学研究,不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速复苏,离心后重悬于预热培养基。
- 培养瓶:酒精消毒外壁,静置培养箱1小时适应环境。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.02%胶原酶)。
- 37℃消化2 - 3分钟,终止后轻柔吹打形成单细胞悬液。
- 注意事项:
- 避免消化超时(防止细胞膜损伤)。
- 首次换液需在传代后12小时内完成。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心后重悬细胞于冻存液,分装至冻存管。
- 梯度降温程序:4℃ 30分钟 → -80℃ 过夜 → 液氮储存。
- 复苏验证:
- 复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法)。
- 功能检测:CD31免疫荧光标记及血管形成实验(P5代内保持活性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)。
- 到货72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)。
- 细胞复苏存活率<90%(经第三方检测确认)。
- 种属鉴定结果与描述不符。
- 不予重发情形:
- 客户超时复苏(>48小时未处理冻存管)。
- 使用非指定培养基或血清导致功能异常。
- 未按规范进行传代或冻存操作。
- 实验操作污染未及时反馈。