一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠脂肪血管基质细胞(Rat Adipose Vascular Stromal Cells)
- 细胞别称:RAVSC;脂肪基质细胞;脂肪血管间充质细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无代谢性疾病史)
- 组织来源:脂肪组织血管基质部分(通过胶原酶消化法分离)
- 生长特性:贴壁生长(依赖纤维连接蛋白或明胶包被)
- 细胞形态:贴壁后呈梭形或多角形,增殖期可见集落状生长
- 细胞代数:P3 - P6(推荐使用代数,确保分化潜能稳定)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:间充质干细胞专用培养基(含10% FBS + 成纤维细胞生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约48 - 72小时(与细胞密度及培养基活性相关)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:酒精擦拭外壁后静置培养箱1小时适应环境
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 5天传代)
- 传代比例:1:2至1:4(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含钙镁离子平衡液)
- 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 避免消化过度(影响细胞表面黏附分子完整性)
- 传代后6小时内避免移动培养瓶以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心后重悬细胞于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟 → - 20℃ 1小时 → - 80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证:
- 复苏后24小时存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:成脂/成骨分化潜能检测(P3代细胞应保持多向分化能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程中温度异常导致细胞失活(需提供温度记录证明)
- 到货48小时内检测出微生物污染(需提供检测报告)
- 细胞复苏存活率低于85%(经第三方验证)
- 细胞标志物鉴定与描述不符(需提供流式检测数据)
- 不予重发情形:
- 未按说明书进行预包被处理导致贴壁失败
- 使用非推荐培养基或血清导致功能异常
- 细胞传代次数超过推荐代数(P6以上)
- 未按要求进行定期支原体检测
(注:以上内容基于科研级细胞产品标准制定,实际操作请以说明书为准。)