一、细胞基本属性
细胞名称
大鼠椎体终板软骨干细胞（Rat Vertebral Endplate Chondrogenic Stem Cells）
细胞别称
VEPC - SCs；椎体终板干细胞；软骨源性干细胞
种属来源
大鼠（Rattus norvegicus）
年龄性别
健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无脊柱退行性疾病史）
组织来源
椎体终板软骨组织（分离自腰椎或胸椎节段）
生长特性
贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
细胞形态
长梭形或多角形，高核质比，单层增殖时呈漩涡状排列
细胞代数
P3 - P8（维持软骨分化潜能及基因组稳定性）
细胞规格
5×10⁴ cells/T25培养瓶或0.5mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
ChondroStem Medium（含10% FBS + 成软骨诱导因子添加剂）
培养条件
气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含8% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间
~ 60 - 84小时（依赖生长因子浓度及细胞密度）
供应限制
仅限科研用途，不可用于临床治疗或异种移植
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管：37℃水浴快速解冻，加3mL预热培养基轻柔混匀
• 培养瓶：75%酒精擦拭表面后静置培养箱1小时平衡
传代标准
细胞融合度达80% - 90%（通常每5 - 7天传代一次）
传代比例
1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法
• 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.1%胶原酶）
• 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项
• 禁止剧烈吹打（保护细胞表面粘附分子）
• 传代后48小时内避免换液以维持微环境稳定
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含8% DMSO及海藻糖保护剂）
细胞密度
冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤
• 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
• 梯度降温：4℃ 20min → - 20℃ 4h → - 80℃过夜 → 转入液氮
复苏验证
• 复苏后48小时台盼蓝染色检测存活率（保证≥85%）
• 功能验证：Alcian blue染色检测软骨基质分泌能力（P5代细胞应保持分化特性）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度记录异常导致细胞失活（需提供温度监测曲线）
2. 7天内证实真菌/支原体污染（需提供荧光定量PCR报告）
3. 细胞贴壁率低于70%（接种24小时显微观察评估）
4. 特异性表面标志物（CD44+/CD105+）检测不达标
不予重发情形
1. 客户未使用胶原包被培养皿导致贴壁失败
2. 自行添加未经验证的生长因子引发异常分化
3. 未按梯度降温流程导致冰晶损伤
4. 超过推荐代数（P8）后出现的功能衰退
