一、细胞基本属性
细胞名称
大鼠肌腱干细胞(Rat Tendon Stem Cells)
细胞别称
RTSC;肌腱源性干细胞;腱干细胞
种属来源
大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别
健康成年大鼠(性别不限,供体经无肌腱损伤筛选)
组织来源
肌腱组织(髌腱或跟腱分离)
生长特性
贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤连蛋白包被)
细胞形态
长梭形或多极成纤维细胞样,高核质比
细胞代数
P3 - P8(确保干细胞表型与分化潜能稳定性)
细胞规格
5×10⁴ cells/T25培养瓶 或0.5mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
α - MEM基础培养基(含10% FBS+1%双抗+10ng/mL bFGF)
培养条件
气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含8% DMSO+20% FBS), - 150℃以下长期储存
倍增时间
~60 - 72小时(与传代密度及生长因子浓度相关)
供应限制
仅用于体外研究,不可用于活体移植或疾病治疗
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒外壁,静置培养箱1小时适应环境
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(通常每4 - 5天传代一次)
传代比例
1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.1%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞脱离
注意事项
- 避免频繁传代导致干细胞特性丢失
- 换液时保留部分条件培养基以维持细胞活性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含8% DMSO+20% FBS+1%海藻糖)
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期储存
复苏验证
- 复苏后48小时检测CD73/CD90阳性率(应≥95%)
- 分化能力验证:成骨/成脂诱导21天后染色确认
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供温度记录)
2. 到货7天内证实微生物污染(需提供检测报告)
3. 流式检测干细胞标志物表达率低于90%
不予重发情形
1. 未使用胶原包被培养器皿导致贴壁失败
2. 擅自更改培养基配方影响细胞特性
3. 超代次使用(P8以上)导致功能异常