一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠骨膜干细胞（Rat Periosteum - Derived Stem Cells）
- 细胞别称：RPSCs；骨膜间充质干细胞；骨膜源性干细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无骨骼疾病史）
- 组织来源：长骨骨膜组织层
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原或纤维连接蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：长梭形或纺锤状，融合后呈旋涡状排列
- 细胞代数：P3 - P8（保证多向分化潜能及增殖活性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：间充质干细胞专用培养基（含10% FBS+成纤维生长因子+抗坏血酸）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：约48 - 72小时（与细胞密度及传代次数相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或生物医药生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻后，加入5mL预温培养基轻柔混匀离心。
- 培养瓶：75%酒精表面消毒，静置培养箱4小时适应环境。
- 传代标准：细胞融合度达80%-90%（建议每4 - 5天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.02%胶原酶）。
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍培养瓶促使细胞脱落。
- 注意事项
- 终止消化时需加入含血清培养基中和。
- 传代后48小时内避免频繁观察，减少物理扰动。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心后重悬细胞于冻存液，分装至标记冻存管。
- 程序降温：4℃ 30分钟 → - 20℃ 2小时 → - 80℃ 24小时 → 液氮长期保存。
- 复苏验证
- 复苏后存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：成骨诱导分化14天后ALP染色阳性率≥70%
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）。
- 收到后72小时内证实微生物污染（需提供检测报告）。
- 细胞贴壁率低于80%（需提供接种后24小时显微图像）。
- 标志物鉴定结果与说明书不符（CD90+/CD45-）。
- 不予重发情形
- 未按规范进行原代扩增直接冻存。
- 使用非配套诱导分化试剂导致功能异常。
- 培养过程中频繁开盖引发污染。
- 未留存复苏细胞样本供溯源比对。
