一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠耳软骨细胞（Rat Auricular Chondrocytes）
- 细胞别称：耳廓软骨细胞、耳软骨祖细胞、耳软骨原代细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无耳部病变史）
- 组织来源：耳软骨组织（经酶消化法分离获得）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原基质或特定包被培养器皿）
- 细胞形态：典型多边形或梭形，胞质透亮，可形成软骨特异性基质
- 细胞代数：P2 - P6（维持软骨细胞表型及分化潜能）
- 细胞规格：5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：软骨细胞专用培养基（含2% FBS+ITS+抗坏血酸+TGF - β添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~72 - 96小时（与传代次数及培养基活性相关）
- 供应限制：仅限体外研究使用，不可用于临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒表面，静置培养箱4小时后再观察贴壁情况
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（避免过度融合导致去分化）
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.2%胶原酶Ⅱ型（37℃消化20 - 30分钟）
- 轻柔吹打至细胞脱离，离心后重悬于新鲜培养基
- 注意事项：
- 避免频繁传代（高代次细胞易丧失软骨特异性标志物）
- 培养期间定期检测细胞外基质分泌能力（阿尔新蓝染色验证）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS+葡萄糖）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化后离心收集细胞，重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃ 12h → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：阿尔新蓝染色检测糖胺聚糖分泌能力（P3代细胞应维持基质合成功能）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录凭证）
- 7日内证实微生物污染（需提供污染检测报告）
- 细胞复苏存活率低于85%（需提供台盼蓝染色影像）
- 细胞种属鉴定与大鼠STR数据库不符
- 不予重发情形：
- 客户未按规范进行胶原酶消化导致细胞损伤
- 使用非推荐培养基或未添加生长因子导致去分化
- 细胞冻存后未及时转移至液氮（超过48小时仍存放于-80℃）
- 未定期检测细胞功能导致实验数据异常
