一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠椎体终盘软骨细胞(Rat Vertebral Endplate Chondrocytes)
细胞别称:RVEPC;椎体终板软骨细胞;脊柱软骨细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无脊柱疾病史)
组织来源:椎体终板软骨组织
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质及特定生长因子)
细胞形态:单层培养呈多角形或梭形,融合后呈铺路石样排列
细胞代数:P3 - P8(维持软骨表型及代谢活性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:软骨细胞专用培养基(含10% FBS +转化生长因子β1添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), -150℃以下长期保存
倍增时间:约72 - 96小时(受培养基成分及细胞密度影响)
供应限制:仅限科学研究,不可用于临床治疗或活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴轻柔解冻,加入5mL预热培养基离心重悬
- 培养瓶:酒精消毒表面后静置于培养箱1小时适应环境
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每4 - 5天传代)
传代比例:1:2至1:3(推荐初始密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含钙镁离子平衡液)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
- 终止消化后需轻柔吹打避免损伤细胞膜
- 传代后48小时内观察细胞贴壁及基质分泌情况
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 预冷离心后缓慢加入冻存液混匀
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证:
- 复苏12小时后检测细胞存活率(台盼蓝法≥90%)
- 功能验证:甲苯胺蓝染色法检测蛋白聚糖分泌能力
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流温度异常导致细胞失活(需提供运输温度记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
3. 细胞贴壁率低于85%(需提供培养24小时显微图像)
4. 种属鉴定结果与标注不符
不予重发情形:
1. 解冻后未按规程进行梯度离心处理
2. 擅自使用非推荐培养基或血清浓度
3. 细胞传代超过P10代后功能异常
4. 实验操作污染导致细胞状态受损
(注:本产品需配合II型胶原酶进行原代分离优化,建议定期检测aggrecan及COL2A1表达以确认细胞特性。)