一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠脂肪细胞(Rat Adipocytes)
细胞别称:脂肪细胞;前脂肪细胞;成熟脂肪细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无代谢疾病史)
组织来源:皮下或内脏脂肪组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:未分化前呈梭形或多角形,分化后胞内充满脂滴呈圆形
细胞代数:P3 - P8(确保脂质代谢功能稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:DMEM/F12基础培养基(含10% FBS+胰岛素+地塞米松+诱导添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞膜保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(分化前增殖期)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或商品化生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
• 培养瓶:75%酒精表面消毒,静置培养箱1小时后观察贴壁情况
传代标准:细胞融合度达70% - 80%(分化诱导前需控制增殖密度)
传代比例:1:2至1:3(分化阶段需调整接种密度至1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
• 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含1mM Ca²⁺)
• 37℃消化3 - 5分钟,脂滴释放后立即终止反应
注意事项:
• 分化诱导阶段需严格按时更换成脂分化培养基
• 避免频繁观察扰动脂滴形成过程
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及脂膜稳定剂)
细胞密度:冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
冻存步骤:
• 分化前细胞离心收集,未分化状态进行冻存
• 程序降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃ 24h → 液氮长期保存
复苏验证:
• 复苏后48小时油红O染色检测脂滴形成能力
• 功能验证:脂联素分泌检测(P5代细胞应维持正常分泌水平)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 干冰运输过程温度记录异常导致细胞失活
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供检测图像)
3. 复苏存活率低于85%(台盼蓝染色法)
4. 物种鉴定结果与标注不符
不予重发情形:
1. 未按规范进行胶原包被导致贴壁失败
2. 擅自使用非指定分化诱导方案
3. 培养过程中接触脂溶性溶剂
4. 超过建议传代次数导致的机能退化