一、细胞基本属性
细胞名称
大鼠肌腱成纤维细胞(Rat Tendon Fibroblasts)
细胞别称
RTF;肌腱细胞;肌腱源性成纤维细胞
种属来源
大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别
健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无肌腱损伤史)
组织来源
肌腱组织(取自跟腱或屈肌腱微解剖段)
生长特性
贴壁生长(需胶原蛋白或纤连蛋白包被培养器皿)
细胞形态
典型长梭形或多极星形,单层贴壁后呈放射状排列
细胞代数
P3 - P6(保证细胞活性与功能稳定性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
DMEM/F12基础培养基(含10% FBS+1%双抗+2mM L - 谷氨酰胺)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
~36 - 48小时(依赖传代密度与培养基质)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
· 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后加预热培养基重悬
· 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
传代比例
1:2至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
· 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.02%胶原酶)
· 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞间隙增大后终止
注意事项
· 避免机械刮取损伤细胞膜完整性
· 首次换液需在传代后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤
· 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液
· 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证
· 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率(≥90%为合格)
· 功能验证:Ⅰ型胶原分泌检测(P4代细胞应维持合成功能)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供无菌检测报告)
3. 复苏后细胞贴壁率低于80%(需提供明场显微图像)
4. 物种鉴定结果与描述不符(需提供STR分析报告)
不予重发情形
1. 未按规范使用胶原包被培养器皿
2. 自行修改培养基配方导致细胞异常
3. 未在液氮保存条件下长期存储冻存管
4. 未执行定期支原体检测引发交叉污染