一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠膈肌细胞（Rat Diaphragm Muscle Cells）
- 细胞别称：膈肌原代细胞；膈肌肌细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无呼吸系统疾病史）
- 组织来源：膈肌组织（经解剖分离及胶原酶消化纯化）
- 生长特性：贴壁生长（依赖明胶或胶原包被培养器皿）
- 细胞形态：梭形或多角形，融合后呈平行束状排列
- 细胞代数：P2 - P5（确保生理功能与收缩特性稳定）
- 细胞规格：5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：骨骼肌细胞专用培养基（含5% FBS+成纤维生长抑制因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖培养密度及培养基活性）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精擦拭表面后静置培养箱1小时，再更换新鲜培养基
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含0.1%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项
- 消化后需加入含血清培养基充分中和酶活性
- 避免机械吹打过度损伤细胞膜结构
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞，缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后12小时检测存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：α - actinin免疫荧光染色确认肌节结构完整性
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度曲线）
- 到货3日内经PCR证实支原体或细菌污染
- 复苏后存活率低于承诺值（需提供染色检测视频）
- 种属鉴定结果与大鼠不符（STR或COI基因检测报告）
- 不予重发情形
- 未按规范进行预包被培养皿处理导致贴壁失败
- 使用含高浓度成纤维细胞生长因子的培养基
- 解冻后静置超过48小时未进行换液操作
- 实验操作不当导致细胞分化特性丧失
