一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠毛囊干细胞(Rat Hair Follicle Stem Cells)
- 细胞别称:RHFSC;毛囊干细胞;毛囊基底上皮干细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别可选,供体无皮肤病及免疫缺陷史)
- 组织来源:皮肤毛囊隆突区及毛囊外根鞘
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原或纤连蛋白包被)
- 细胞形态:集落样增殖,单层呈多角形或梭形,核质比高
- 细胞代数:P3 - P8(维持干性标记物表达及分化潜能)
- 细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:干细胞专用培养基(含2% FBS+EGF/bFGF生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约60 - 72小时(依赖生长因子浓度及细胞密度)
- 应用领域:皮肤再生研究、毛囊周期调控、脱发机制及组织工程模型构建
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴解冻后,离心去除冻存液,加入预温培养基重悬。
- 培养瓶:酒精擦拭表面,静置30分钟后移入培养箱。
- 传代标准:细胞集落覆盖80% - 90%或单层融合达70% - 80%
- 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用试剂:0.25%胰酶 - 0.02% EDTA或Accutase。
- 操作步骤:37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落,立即加血清中和。
- 注意事项
- 避免机械吹打过度损伤细胞膜完整性。
- 传代后48小时内避免频繁观察,减少物理扰动。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化后离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液。
- 程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃冷冻盒过夜→液氮长期储存。
- 复苏验证
- 复苏存活率:≥85%(台盼蓝染色法)
- 干性验证:免疫荧光检测CD34/K15标志物阳性率≥90%
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)。
- 到货72小时内检测出微生物污染(需提供第三方检测报告)。
- 细胞标志物表达率低于技术参数(需提供流式检测数据)。
- 细胞活率未达承诺标准(经我方实验室复检确认)。
- 不予重发情形
- 未使用指定包被基质导致细胞贴壁失败。
- 自行修改培养基配方引发分化或功能丧失。
- 解冻后未及时接种或反复冻融。
- 未按规范进行细胞传代(如高密度传代导致分化)。
(注:本产品仅限科学研究,不可用于临床或药物开发)