一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠滑膜间充质干细胞(Rat Synovial Mesenchymal Stem Cells)
- 细胞别称:rSMSC;滑膜MSC;滑膜间充质干细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无关节疾病史)
- 组织来源:膝关节滑膜组织(经胶原酶消化法分离)
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质涂层)
- 细胞形态:长梭形或纤维状,单层贴壁后呈漩涡状排列
- 细胞代数:P3 - P5(推荐使用代数以确保分化潜能与增殖活性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:大鼠间充质干细胞专用培养基(含10% FBS+成纤维细胞生长因子+GlutaMAX)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(受细胞密度及传代操作影响)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻后,加入5mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80%-90%(推荐每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(建议初始接种密度为3×10³ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止反应
- 注意事项
- 避免消化时间过长(防止膜蛋白损伤)
- 首次换液需在接种后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心后弃上清,轻柔重悬细胞于冻存液
- 程序降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃ 12h → 液氮长期储存
- 复苏验证
- 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:成骨诱导分化实验(P3代细胞应具备三系分化潜能)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度监控截图)
- 5日内证实微生物污染(需提供无菌检测报告)
- 复苏后存活率低于85%(需提供台盼蓝染色影像)
- 细胞STR位点与数据库不匹配
- 不予重发情形
- 客户未按规范进行细胞复苏(如常温放置超10分钟)
- 使用非指定培养基导致分化异常
- 实验污染回溯为操作环境问题
- 未进行细胞鉴定直接用于下游实验