一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠脂肪干细胞(Rat Adipose - Derived Stem Cells)
细胞别称:rADSC;脂肪间充质干细胞;脂肪源性干细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别可选,供体无代谢性疾病史)
组织来源:腹股沟或附睾脂肪垫
生长特性:贴壁生长(依赖胶原酶消化分离)
细胞形态:成纤维细胞样,长梭形,单层贴壁后呈漩涡状排列
细胞代数:P3 - P10(保持多向分化潜能及增殖活性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:ADSC专用培养基(含10% FBS + 成纤维生长因子添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含8% DMSO及营养保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与传代密度及血清批次相关)
供应限制:仅限科学研究,不可用于临床或生物医药生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:酒精擦拭外壁后静置培养箱4小时再换液
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:4(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁至细胞脱落立即终止
注意事项:
- 避免消化过度(影响细胞表面标志物表达)
- 首次换液需在接种后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO + 20% FBS)
细胞密度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心后重悬细胞于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 20min → - 80℃ 4h → 液氮长期保存
复苏验证:
- 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥85%)
- 功能验证:成骨/成脂诱导分化实验(P5代细胞应保持多向分化能力)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货5天内证实微生物污染(需提供检测结果)
3. 细胞贴壁率低于70%(需提供接种后24小时显微照片)
4. 物种鉴定结果与大鼠基因组不符
不予重发情形:
1. 未按规范进行预培养直接冻存
2. 使用高浓度血清(>15%)导致分化异常
3. 长期传代(>P12)后功能衰退
4. 未进行流式检测(CD90+/CD44+/CD45 - )即质疑细胞特性
(注:所有操作需符合生物安全规范,细胞特性数据基于批次检测报告)