一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠骨髓间充质干细胞(Rat Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells)
细胞别称:BMSC;骨髓基质细胞;骨髓干细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无特定疾病史)
组织来源:骨髓腔(股骨/胫骨骨髓)
生长特性:贴壁生长(依赖纤维连接蛋白/胶原包被培养器皿)
细胞形态:长梭形或多角形,增殖期呈漩涡状排列
细胞代数:P3 - P8(确保多向分化潜能及遗传稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Mesenchymal Stem Cell Medium(含10% FBS + 双抗 + 成纤维生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及海藻糖), - 150℃以下长期保存
倍增时间:约24 - 48小时(与细胞代次及培养条件相关)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍培养瓶至细胞层脱落
注意事项:
- 终止消化时需加入含血清培养基中和酶活性
- 首次传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO及葡萄糖衍生物)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证:
- 复苏后12小时台盼蓝染色存活率≥85%
- 功能验证:三系分化能力检测(成骨/成脂/成软骨分化实验)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 到货7天内经检测证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞复苏后存活率低于80%(台盼蓝染色法复测)
4. 细胞表面标志物CD90/CD29阳性率<90%(流式检测结果)
不予重发情形:
1. 未按规范进行原代细胞贴壁筛选
2. 自行修改培养基配方导致分化能力丧失
3. 实验操作不当引起细胞应激性衰老
4. 未使用推荐包被试剂影响细胞贴壁效率
(注:以上内容基于大鼠骨髓间充质干细胞生物学特性编写,实际操作请参考具体产品说明书及文献标准流程)