一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠毛囊角质细胞（Rat Hair Follicle Keratinocytes）
- 细胞别称：RFKC；毛囊角质形成细胞；毛囊表皮细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无皮肤疾病史）
- 组织来源：皮肤组织毛囊段（分离自触须或背部毛囊）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白或纤维连接蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：多边形铺展形态，汇合后呈典型“铺路石样”单层排列
- 细胞代数：P3 - P6（推荐使用代数，确保角蛋白表达稳定性）
- 细胞规格：5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用无血清冻存液）
- 培养基：角质细胞无血清培养基（含0.05mM Ca²⁺、表皮生长因子及胰岛素添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， -150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 48小时（依赖培养基活性成分及接种密度）
- 供应限制：仅限体外研究使用，不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.02%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项：
- 消化后需轻柔吹打以避免角蛋白脱落
- 传代后12小时内更换新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及胎牛血清替代物）
- 细胞密度：冻存浓度1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，重悬于预冷冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟→ -80℃ 24小时→转移至液氮
- 复苏验证：
- 存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：角蛋白K14/K10免疫荧光染色（P4代细胞应保持表达特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中干冰耗尽导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内证实细菌/真菌污染（需提供污染检测图像）
- 复苏存活率低于85%（需提供台盼蓝染色结果）
- 种属鉴定与大鼠不符（需提供PCR检测报告）
- 不予重发情形：
- 使用非指定培养基或添加未经验证的生长因子
- 细胞解冻后未在48小时内进行传代或冻存
- 实验操作污染导致细胞状态异常
- 未按规范进行角蛋白标记物鉴定即发表数据
