大鼠外根鞘细胞

大鼠原代细胞

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XM-X02815×10^5大鼠原代细胞6000


一、细胞基本属性

细胞名称:大鼠外根鞘细胞(Rat Outer Root Sheath Cells)

细胞别称:ORS细胞;毛囊外根鞘细胞;毛囊干细胞

种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)

年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,无皮肤病史)

组织来源:毛囊外根鞘组织

生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)

细胞形态:长梭形或多角形,呈铺路石样单层排列

细胞代数:P3 - P6(维持毛囊干细胞特性及分化潜能)

细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)

培养基:DMEM/F12+10% FBS+表皮生长因子(10ng/mL)

培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%

冻存条件:无血清冻存液(含8% DMSO及海藻糖),液氮长期保存

倍增时间:约60 - 72小时(受培养密度及生长因子浓度影响)

供应限制:仅限体外研究使用,不可用于活体移植或药物生产


二、细胞培养操作指南

收货处理:

• 冻存管:37℃水浴解冻后离心去冻存液,加3mL预温培养基重悬

• 培养瓶:酒精擦拭后静置培养箱1小时再换液

传代标准:融合度达80% - 85%(避免过度融合导致自发分化)

传代比例:1:2至1:3(建议接种密度4×10³ cells/cm²)

消化方法:

• 使用0.25%胰蛋白酶 - 0.02% EDTA复合消化液

• 37℃消化3 - 5分钟,轻拍培养瓶促进细胞脱落

注意事项:

• 消化终止时需加入含血清培养基中和

• 推荐使用IV型胶原包被培养皿增强贴壁效率


三、细胞冻存操作规范

冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO+5%蔗糖)

细胞密度:1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL

冻存步骤:

• 4℃预冷15分钟后分装入冻存管

• 程序降温:4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃ 12h → 液氮储存

复苏验证:

• 复苏后48小时检测CK15及KRT75标志物表达(流式细胞术)

• 克隆形成率检测应≥70%(P3代细胞标准)


四、售后服务承诺

重发标准:

1. 运输过程温度记录异常(需提供物流温度监控截图)

2. 到货7日内PCR检测证实支原体污染

3. 细胞活性低于85%(AO/PI双染法检测)

4. 种属鉴定与大鼠STR数据库不符

不予重发情形:

1. 未按手册要求进行胶原包被导致贴壁失败

2. 擅自添加分化诱导因子改变细胞特性

3. 使用非指定传代试剂造成细胞损伤

4. 超过14天未进行首次传代操作