一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠真皮毛乳头细胞(Rat Dermal Papilla Cells)
- 细胞别称:RDPC;毛乳头细胞;毛囊真皮乳头细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年鼠(性别可指定,供体筛选无皮肤病及内分泌疾病史)
- 组织来源:真皮毛乳头组织(毛囊球部微解剖分离)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原包被培养器皿)
- 细胞形态:短梭形或星状,聚集成团时呈现特征性“菊花样”排列
- 细胞代数:P3 - P6(维持毛囊诱导活性关键期)
- 细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(预充无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12基础培养基(含10% FBS+毛囊相关生长因子补充剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂+ 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及胎牛血清替代物),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约60 - 84小时(依赖细胞聚集体形成状态)
- 供应限制:仅限体外研究使用,不可用于临床或体内移植实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管需37℃水浴轻摇解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基。培养瓶运输需静置4小时恢复贴壁,避免震荡。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(需保留少量细胞团以维持特性)。
- 传代比例:建议1:2分瓶(单细胞悬液需混合少量未消化细胞团)。
- 消化方法:采用0.25%胰酶 - 胶原酶混合消化液,37℃作用3 - 5分钟,离心后轻柔吹打保留部分细胞团块。
- 注意事项:传代后48小时内避免换液,维持细胞团簇结构完整性。长期单层培养可能导致去分化。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO+20%胎牛血清替代物)。
- 细胞密度:推荐冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤:离心收集细胞团块,重悬后分装至冻存管。程序降温:4℃平衡30分钟,-80℃过夜后转入液氮。
- 复苏验证:复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)。功能验证需通过ALP活性检测(P4代细胞碱性磷酸酶活性应>50mU/mg)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 物流温度记录异常导致细胞失活(需提供运输温度曲线)
- 到货72小时内经PCR证实支原体污染
- STR分型与物种信息不符
- 复苏后活率低于承诺值(附检测视频)
- 不予重发情形:
- 未按推荐方法进行胶原包被培养
- 强制单细胞传代导致特性丢失
- 超低温保存设备异常导致的反复冻融
- 超过建议代数(P6)后出现的功能衰退