一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠脂肪微血管内皮细胞(Rat Adipose Microvascular Endothelial Cells)
- 细胞别称:RAMVEC;脂肪微血管内皮细胞;脂肪内皮细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无代谢性疾病史)
- 组织来源:脂肪组织微血管段
- 生长特性:贴壁生长(需明胶包被培养器皿)
- 细胞形态:单层铺路石状排列,接触抑制后呈梭形或多角形
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能活性与遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:内皮细胞专用培养基(含5% FBS、ECGS生长因子及肝素)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:约48 - 60小时(与基质包被密度相关)
- 供应限制:仅用于体外研究,不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶:酒精消毒表面后静置培养箱平衡1小时
- 传代标准:融合度达80% - 90%(建议每3天观察一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下确认细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 消化后需完全中和酶活性(避免影响细胞贴壁)
- 首次换液建议在传代后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
- 细胞密度:1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL(保证复苏存活率)
- 冻存步骤:
- 离心后重悬细胞于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证:
- 存活率检测:台盼蓝染色法(标准≥90%)
- 功能验证:CD31免疫荧光染色(P5代细胞应保持特异性表达)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 72小时内证实微生物污染(需提交污染检测报告)
- 细胞存活率低于85%(按标准方法检测)
- 种属鉴定结果不符
- 不予重发情形:
- 客户未按规范进行细胞复苏(如室温放置超30分钟)
- 自行更换培养基导致功能异常
- 实验操作污染未及时反馈
- 未进行细胞传代前检测直接扩增使用
(注:所有操作需符合生物安全二级实验室标准,细胞特性可能因实验条件产生正常生物学波动。)