大鼠脂肪微血管内皮细胞

大鼠原代细胞

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XM-X02795×10^5大鼠原代细胞4560


一、细胞基本属性

- 细胞名称:大鼠脂肪微血管内皮细胞(Rat Adipose Microvascular Endothelial Cells)

- 细胞别称:RAMVEC;脂肪微血管内皮细胞;脂肪内皮细胞

- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)

- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无代谢性疾病史)

- 组织来源:脂肪组织微血管段

- 生长特性:贴壁生长(需明胶包被培养器皿)

- 细胞形态:单层铺路石状排列,接触抑制后呈梭形或多角形

- 细胞代数:P3 - P8(确保功能活性与遗传稳定性)

- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)

- 培养基:内皮细胞专用培养基(含5% FBS、ECGS生长因子及肝素)

- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%

- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存

- 倍增时间:约48 - 60小时(与基质包被密度相关)

- 供应限制:仅用于体外研究,不可用于临床或活体实验


二、细胞培养操作指南

- 收货处理:

  - 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预温培养基轻柔混匀

  - 培养瓶:酒精消毒表面后静置培养箱平衡1小时

- 传代标准:融合度达80% - 90%(建议每3天观察一次)

- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)

- 消化方法:

  - 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含0.02% EDTA)

  - 37℃消化2 - 3分钟,镜下确认细胞边缘卷曲后终止

- 注意事项:

  - 消化后需完全中和酶活性(避免影响细胞贴壁)

  - 首次换液建议在传代后12小时内完成


三、细胞冻存操作规范

- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)

- 细胞密度:1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL(保证复苏存活率)

- 冻存步骤:

  - 离心后重悬细胞于冻存液,分装至冻存管

  - 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮储存

- 复苏验证:

  - 存活率检测:台盼蓝染色法(标准≥90%)

  - 功能验证:CD31免疫荧光染色(P5代细胞应保持特异性表达)


四、售后服务承诺

- 重发标准:

  - 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)

  - 72小时内证实微生物污染(需提交污染检测报告)

  - 细胞存活率低于85%(按标准方法检测)

  - 种属鉴定结果不符

- 不予重发情形:

  - 客户未按规范进行细胞复苏(如室温放置超30分钟)

  - 自行更换培养基导致功能异常

  - 实验操作污染未及时反馈

  - 未进行细胞传代前检测直接扩增使用


(注:所有操作需符合生物安全二级实验室标准,细胞特性可能因实验条件产生正常生物学波动。)