一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠角质形成细胞(Rat Epidermal Keratinocytes)
细胞别称:REK;表皮角质形成细胞;皮肤角质细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,无皮肤病史)
组织来源:皮肤表皮层
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:单层铺路石样,高密度时呈紧密镶嵌排列
细胞代数:P3 - P8(保持表皮细胞分化特性)
细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:表皮角质形成细胞专用培养基(含5% FBS+表皮生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及稳定剂),液氮长期保存
倍增时间:约48 - 72小时(受培养基批次及接种密度影响)
供应限制:仅用于科学研究,禁止临床或动物移植
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精擦拭外壁,静置培养箱1小时适应环境
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(初始密度建议3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
- 消化终止后需完全中和胰酶活性
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+海藻糖保护剂)
细胞密度:推荐1×10⁶ cells/mL(最低不低于5×10⁵ cells/mL)
冻存步骤:
- 离心收集细胞,轻柔混悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证:
- 存活率检测:复苏后12小时台盼蓝染色(≥90%为合格)
- 功能验证:免疫荧光检测角蛋白K14表达(P5代细胞需保持≥95%阳性率)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 收到后72小时内证实微生物污染(需提交污染检测结果)
3. 细胞存活率低于90%(经第三方检测确认)
4. 细胞种属鉴定与描述不符
不予重发情形:
1. 客户未按规范进行胶原包被直接接种
2. 使用含高钙离子培养基导致过早分化
3. 培养环境温度波动超过±2℃
4. 未定期检测细胞分化标志物影响实验结果
(注:本产品需配合专用表皮细胞分化试剂盒使用,详细操作参见随附技术手册。)