一、细胞基本属性
1. 细胞名称：大鼠皮肤成纤维细胞（Rat Skin Fibroblasts）
2. 细胞别称：RSF；皮肤成纤维细胞；真皮成纤维细胞
3. 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
4. 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无皮肤病或创伤史）
5. 组织来源：皮肤组织真皮层
6. 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
7. 细胞形态：长梭形，贴壁伸展后呈放射状或漩涡状排列
8. 细胞代数：P3 - P8（保证增殖活性与功能稳定性）
9. 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
10. 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%双抗）
11. 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
12. 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
13. 倍增时间：~24 - 48小时（依赖血清浓度与细胞密度）
14. 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱4小时平衡
2. 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
3. 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
4. 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化1 - 1.5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落后终止
5. 注意事项
- 消化终止需加入等体积含血清培养基
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及胎牛血清替代物）
2. 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 离心收集细胞后缓慢滴加冻存液重悬
- 梯度降温：4℃ 30min→ - 20℃ 2h→ - 80℃过夜→液氮长期保存
4. 复苏验证
- 复苏后24小时贴壁率需≥85%（台盼蓝染色存活率≥95%）
- 功能验证：胶原分泌检测（P5代细胞应维持Ⅳ型胶原分泌能力）
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供液氮罐运输记录）
- 7日内证实微生物污染（需提供PCR或培养法检测结果）
- 细胞复苏后贴壁率低于80%（需提供相差显微镜图像）
- 种属鉴定结果与描述不符
2. 不予重发情形
- 收货后未及时处理导致培养基酸化
- 使用非推荐消化方法造成细胞膜损伤
- 未按梯度降温直接冻存引发冰晶损伤
- 未进行定期支原体检测导致交叉污染
