一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠破骨细胞(Rat Osteoclasts)
细胞别称:Rattus Osteoclasts;骨髓源性破骨细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无骨骼疾病史)
组织来源:骨髓单核细胞经体外诱导分化
生长特性:贴壁生长(需骨片或骨模拟基质支持)
细胞形态:多核巨细胞(TRAP染色阳性,边缘褶皱明显)
细胞代数:原代细胞(建议使用诱导后5天内)
细胞规格:5×10⁴ cells/24孔板(含诱导培养基)或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:α -MEM基础培养基(含10% FBS+50ng/mL RANKL+25ng/mL M -CSF)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
功能特性:具备骨吸收活性(可通过骨陷窝实验验证)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物移植
二、细胞培养操作指南
收货处理:
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预冷诱导培养基
• 预分化细胞:直接转移至含骨片的培养板静置培养
传代标准:原代细胞不建议传代(建议直接用于骨吸收实验)
诱导分化:
• 取骨髓单核细胞,添加RANKL+M -CSF诱导5 -7天
• 每3天半量换液,维持细胞因子浓度
功能验证:
• TRAP染色阳性率≥90%(多核细胞占比>3核/细胞)
• 骨片培养48小时可见典型吸收陷窝
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
冻存密度:1×10⁶ cells/mL(仅限未分化的单核前体细胞)
冻存步骤:
• 离心收集单核细胞,重悬于冻存液
• 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证:
• 复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法)
• 诱导分化能力检测:TRAP阳性细胞生成率需达原代水平
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供温度记录证明)
2. 到货72小时内证实支原体污染(需提供检测报告)
3. 单核前体细胞存活率<80%(经台盼蓝复检)
不予重发情形:
1. 诱导分化后细胞冻存(破骨细胞终末分化不可冻存)
2. 未使用配套骨片或RANKL/M -CSF因子
3. 未按规范进行TRAP染色功能验证
4. 收货后超48小时未启动诱导程序