一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠髓核细胞（Rat Nucleus Pulposus Cells）
- 细胞别称：RNPC；髓核细胞；椎间盘髓核细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无脊柱病变史）
- 组织来源：椎间盘髓核组织（经无菌分离提取）
- 生长特性：贴壁生长（需特定细胞外基质支持）
- 细胞形态：贴壁后呈类圆形或多角形，聚集时可形成团簇结构
- 细胞代数：P2 - P6（推荐使用代数，确保功能稳定性）
- 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含专用无血清冻存液）
- 培养基：髓核细胞专用培养基（含5% FBS +生长因子及抗炎添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约72 - 96小时（受细胞密度及培养条件影响）
- 供应限制：仅限科学研究，不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基；培养瓶：酒精擦拭表面后静置培养箱2小时平衡温湿度。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每4 - 5天传代一次）。
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）。
- 消化方法：使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺缓冲液），37℃消化3 - 5分钟，显微镜下观察细胞边缘收缩后终止消化。
- 注意事项：避免剧烈吹打导致细胞团块损伤；传代后48小时内避免频繁移动培养瓶以促进贴壁。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：专用无血清冻存液（含10% DMSO及糖原保护剂）。
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：消化离心收集细胞，重悬于冻存液后分装至冻存管；梯度降温程序：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存。
- 复苏验证：复苏后24小时检测细胞存活率（台盼蓝染色法≥90%）；功能验证：通过胶原蛋白分泌检测及SOX9免疫荧光染色确认细胞特性。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）；
- 7天内经检测确认支原体或细菌污染（需提供检测报告）；
- 复苏后存活率低于85%；
- 物种鉴定结果与描述不符。
- 不予重发情形：
- 客户未按规范进行细胞复苏或培养；
- 使用非推荐培养基或添加剂导致功能异常；
- 因反复冻融或不当操作引起的细胞损伤；
- 超过收货后72小时未反馈问题。
（注：以上参数基于标准实验条件，实际应用需根据具体研究需求优化。）
