一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠骨骼肌成纤维细胞（Rat Skeletal Muscle Fibroblasts）
- 细胞别称：RSMF；骨骼肌间质细胞；肌成纤维细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无肌肉疾病史）
- 组织来源：骨骼肌组织（经酶消化法分离纯化）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被的培养器皿）
- 细胞形态：长梭形或不规则三角形，贴壁伸展后呈放射状排列
- 细胞代数：P3 - P8（确保细胞活性及功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12培养基（含10%FBS + 1%双抗+成纤维细胞生长因子）
- 培养条件：气相：5%CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10%DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 48小时（依赖培养密度及血清浓度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基；培养瓶：75%酒精擦拭外壁，静置培养箱平衡2小时后换液。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA溶液，37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后立即用含血清培养基终止。
- 注意事项：避免消化时间过长导致细胞膜损伤；传代后12小时建议全量换液以去除细胞碎片。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10%DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶cells/mL
- 冻存步骤：离心收集细胞，重悬于冻存液后分装至冻存管；梯度降温程序：4℃30分钟→ - 20℃2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
- 复苏验证：复苏后24小时内台盼蓝染色检测存活率（≥90%）；功能验证：胶原分泌检测或细胞增殖能力测试（P5代细胞需维持典型成纤维特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中温度异常导致细胞死亡（需提供温度记录证明）；
- 到货72小时内证实细菌/真菌污染（需提供污染检测结果）；
- 细胞复苏后活力低于90%（需提供台盼蓝染色图像）；
- 种属鉴定结果与描述不符。
- 不予重发情形：
- 细胞到货后超过72小时未按规范复苏；
- 使用非推荐培养基或未定期传代导致细胞老化；
- 自行修改冻存条件或反复冻融；
- 未进行污染检测直接用于实验导致交叉污染。
