一、细胞基本属性
1. 细胞名称:大鼠骨骼肌细胞(Rat Skeletal Muscle Cells)
2. 细胞别称:RSMC;骨骼肌成肌细胞;肌源性祖细胞
3. 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
4. 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无肌肉疾病史)
5. 组织来源:后肢骨骼肌组织
6. 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
7. 细胞形态:长梭形单核细胞,融合后形成多核肌管结构
8. 细胞代数:P2 - P6(原代细胞传代次数有限,建议优先使用低代次)
9. 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
10. 培养基:骨骼肌细胞专用培养基(含10% FBS + 成肌分化因子添加剂)
11. 培养条件:气相:5% CO₂+ 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
13. 倍增时间:~72 - 96小时(原代细胞增殖速率受血清浓度及密度影响)
14. 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精消毒表面,静置培养箱4小时待细胞贴壁
2. 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每5 - 7天传代一次)
3. 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
4. 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含胶原酶辅助消化)
- 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
5. 注意事项
- 避免剧烈吹打(防止多核肌管断裂)
- 分化阶段需更换低血清分化培养基
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
2. 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 消化后离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期储存
4. 复苏验证
- 复苏后48小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥85%)
- 功能验证:肌管形成实验(P3代细胞应具备分化潜力)
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 5日内证实微生物污染(需提供荧光染色或PCR结果)
- 细胞贴壁率低于80%(需提供接种后24小时显微图像)
- 物种鉴定与描述不符(STR检测报告为证)
2. 不予重发情形
- 未按规范预包被胶原导致细胞贴壁失败
- 分化阶段擅自使用高浓度血清干扰实验
- 未及时更换分化培养基影响肌管形成
- 未执行无菌操作引发污染后继续培养