一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠滑膜成纤维细胞（Rat Synovial Fibroblasts）
- 细胞别称：Synoviocyte Fibroblasts；关节滑膜细胞；滑膜成纤维样细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无关节疾病史）
- 组织来源：关节滑膜组织（经胶原酶消化法分离）
- 生长特性：贴壁生长（依赖纤维连接蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：典型长梭形或多角形，细胞间连接紧密呈网状排列
- 细胞代数：P3 - P6（确保功能活性及低传代稳定性）
- 细胞规格：5×10⁴ cells/T25培养瓶或0.5mL冻存管（含专用冻存液）
- 培养基：DMEM/F12基础培养基（含10% FBS+1%双抗+成纤维细胞生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清细胞冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂），液氮长期保存
- 倍增时间：约36 - 48小时（与细胞密度及生长因子浓度相关）
- 供应限制：仅用于体外研究，禁止临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入3mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶：酒精消毒表面后静置培养箱4小时再换液
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:4（推荐初始接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.02%胶原酶辅助消化）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：
- 终止消化后需立即离心去除消化酶残留
- 首次传代建议保留原代培养基50%以维持细胞特性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：血清替代型冻存液（含10% DMSO+胎牛血清替代物）
- 细胞密度：冻存浓度1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化后细胞离心去上清，轻柔重悬于冻存液
- 程序降温：4℃平衡30分钟 → 冻存管装入梯度降温盒（-1℃/min） → -80℃过夜后转液氮
- 复苏验证：
- 复苏后48小时内检测细胞贴壁率（应≥85%）
- 功能验证：胶原分泌检测（P4代细胞应保持ECM合成能力）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 物流温度记录异常导致细胞失活（需提供温度监控截图）
- 5日内证实真菌/支原体污染（需提供第三方检测报告）
- 复苏后细胞存活率低于80%（台盼蓝染色法复检确认）
- 物种鉴定结果与标识不符（STR比对报告为证）
- 不予重发情形：
- 未按规范进行预包被处理导致细胞贴壁失败
- 自行更改培养基配方引发细胞功能异常
- 解冻后未及时接种（超过推荐复苏时间6小时）
- 实验操作污染未及时反馈（收货超7天不予受理）
