一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠骨细胞(Rat Osteocytes)
- 细胞别称:骨细胞;骨组织细胞;骨陷窝细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体无骨骼系统疾病史)
- 组织来源:股骨或胫骨骨组织(机械分离结合酶消化法)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:星状或多突触形态,胞体位于骨陷窝内
- 细胞代数:P2 - P6(确保成骨分化潜能稳定)
- 细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:Osteocyte Differentiation Medium(含β - 甘油磷酸钠、抗坏血酸及10% FBS)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖),液氮长期保存
- 倍增时间:约72 - 96小时(受骨组织来源及分化阶段影响)
- 供应限制:仅用于基础科研,禁止转售或临床用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管需37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶收货后静置4小时再换液。
- 传代标准:融合度达80% - 90%(建议每5 - 7天传代一次)。
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)。
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - 胶原酶混合液,37℃消化3 - 5分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后终止。
- 注意事项:避免频繁观察扰动细胞贴壁;传代后48小时内勿更换培养基。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:专用无血清冻存液(含10% DMSO、20% FBS及渗透保护剂)。
- 细胞密度:冻存浓度1×10⁶ cells/mL,每管分装1mL。
- 冻存步骤:消化离心后重悬于冻存液,程序降温盒 - 80℃过夜后转移至液氮。
- 复苏验证:复苏后48小时检测碱性磷酸酶活性(ALP≥2.5 U/mg蛋白),活率≥90%。
四、售后服务承诺
- 重发标准:1.运输过程干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录);2.到货72小时内证实支原体污染(需第三方检测报告);3.STR鉴定与物种不符。
- 不予重发情形:1.未使用配套培养基导致细胞分化异常;2.解冻后超96小时未贴壁;3.自行修改冻存程序引发冰晶损伤;4.未按规范进行矿化诱导实验。