一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠阴道真皮成纤维细胞（Rat Vaginal Dermal Fibroblasts）
- 细胞别称：RVDF；阴道真皮成纤维细胞；阴道成纤维细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年雌性大鼠（供体经病理学筛查无生殖系统疾病）
- 组织来源：阴道真皮组织（经胶原酶消化法分离）
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质附着）
- 细胞形态：典型长梭形或不规则三角形，贴壁伸展后呈放射状排列
- 细胞代数：P3 - P8（确保细胞功能活性及遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用无血清冻存液）
- 培养基：成纤维细胞专用培养基（含10% FBS+双抗+生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约36 - 48小时（受细胞密度及培养条件影响）
- 供应限制：仅限科学研究使用，不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻后，加入预热培养基离心去冻存液，重悬接种。
- 培养瓶：酒精擦拭表面后静置于培养箱1小时，待温度平衡后更换新鲜培养基。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）。
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）。
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液（含Ca²⁺/Mg²⁺平衡液）。
- 37℃消化2 - 3分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止反应。
- 注意事项：
- 避免消化时间过长导致细胞膜损伤。
- 传代后6小时内避免频繁移动培养瓶，确保细胞贴壁稳定性。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透压稳定剂）。
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，轻柔重悬于冻存液并分装至冻存管。
- 梯度降温程序：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
- 复苏验证：
- 复苏后24小时检测细胞存活率（台盼蓝染色法，存活率≥90%）。
- 功能验证：通过胶原分泌实验（P5代细胞应保持正常合成功能）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中干冰耗尽或温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）。
- 收货后3日内经检测证实支原体或细菌污染（需提交第三方检测报告）。
- 复苏后细胞存活率低于90%（需提供台盼蓝染色照片及操作视频）。
- 细胞STR鉴定与产品描述不符。
- 不予重发情形：
- 客户未按规范在72小时内复苏细胞。
- 使用非推荐培养基或自行修改培养条件导致细胞状态异常。
- 因反复冻融或操作不当引起的细胞损伤。
- 未进行规范检测直接用于实验而引发的争议。
