一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠子宫微血管内皮细胞(Rat Uterine Microvascular Endothelial Cells)
- 细胞别称:RUMVEC;子宫微血管内皮细胞;子宫血管内皮细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无子宫病变史)
- 组织来源:子宫组织微血管段
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质成分)
- 细胞形态:典型“铺路石样”单层,接触抑制后呈规则多角形
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能活性与遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:大鼠内皮细胞专用培养基(含5% FBS+内皮生长因子及肝素添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约48 - 72小时(受培养密度及基质影响)
- 供应限制:仅限科研使用,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入预热培养基离心重悬
- 培养瓶:酒精消毒后静置于培养箱2小时恢复贴壁
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每3 - 4天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺缓冲液)
- 37℃消化30 - 60秒,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 避免消化超时(防止细胞膜完整性受损)
- 首次换液需在传代后12 - 18小时内完成
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞,缓慢加入冻存液混匀
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:Ⅷ因子相关抗原免疫荧光鉴定(P5代细胞阳性率≥95%)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 5天内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
- 细胞复苏存活率低于85%(需提供染色图像)
- 种属鉴定与描述不符(STR比对结果异常)
- 不予重发情形:
- 客户未按推荐条件保存或复苏(如超时未处理)
- 自行更改培养基成分导致功能异常
- 实验操作失误引发交叉污染
- 未留存冻存备份细胞用于争议复检