一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠附睾上皮细胞(Rat Epididymal Epithelial Cells)
细胞别称:附睾上皮细胞;REpiC;附睾管状上皮细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年雄性大鼠(SPF级,8 - 10周龄)
组织来源:附睾组织(头部至尾部全段)
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:单层铺展后呈立方状或多边形,细胞间连接紧密
细胞代数:P3 - P6(确保功能蛋白表达稳定性)
细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Epithelial Cell Medium(含5% FBS+上皮细胞特异性生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含8% DMSO及海藻糖保护剂),液氮气相长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与细胞分化状态相关)
供应限制:仅用于基础研究,不可应用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴解冻后转移至15mL离心管,加3mL培养基离心去冻存液
培养瓶:表面消毒后直接置于CO₂培养箱,4小时后首次换液
传代标准:细胞融合度达80% - 85%(建议培养周期不超过5天)
传代比例:1:2至1:4(依据实验需求调整接种密度)
消化方法:
使用0.25%胰酶 - 0.02% EDTA溶液
37℃消化3 - 5分钟,轻拍培养瓶促使细胞脱落
注意事项:
消化终止需使用含血清培养基
传代后12小时内避免移动培养器皿
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO+10% FBS)
细胞密度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
离心收集细胞后轻柔混悬于冻存液
程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃冷冻盒过夜→液氮长期储存
复苏验证:
复苏后活率≥85%(AO/PI双染法检测)
功能验证:免疫荧光鉴定ZO - 1紧密连接蛋白表达
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 干冰运输全程未维持 - 70℃以下(需温度记录证明)
2. 到货48小时内证实微生物污染(提供污染检测图像)
3. 细胞活性低于承诺标准(附检测视频)
4. 种属鉴定结果不符
不予重发情形:
1. 未使用指定胶原包被培养器皿
2. 自行修改培养基配方导致功能异常
3. 消化时间超过10分钟造成膜损伤
4. 未执行推荐传代频率导致分化