一、细胞基本属性
1. 细胞名称：大鼠子宫内膜干细胞（Rat Endometrial Stem Cells）
2. 细胞别称：大鼠子宫干细胞；子宫内膜间充质干细胞；RESC
3. 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
4. 年龄性别：健康雌性成年大鼠（供体经病理筛选，无生殖系统疾病史）
5. 组织来源：子宫内膜基底层的间质组织
6. 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被的培养基底）
7. 细胞形态：贴壁后呈纺锤形或多角形，融合后形成紧密单层
8. 细胞代数：P3 - P8（维持干细胞特性及分化潜能）
9. 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
10. 培养基：间充质干细胞专用培养基（含5% FBS+成纤维生长因子+表皮生长因子）
11. 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
12. 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
13. 倍增时间：~60 - 72小时（依赖细胞密度及生长因子浓度）
14. 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或活体移植
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预温培养基轻柔混匀离心，弃上清后重悬接种
- 培养瓶：酒精消毒表面后直接置于培养箱平衡1小时，再更换新鲜培养基
2. 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每4 - 5天传代一次）
3. 传代比例：1:2至1:3（推荐初始密度3×10³ cells/cm²）
4. 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液，37℃消化2 - 3分钟
- 显微镜下观察细胞边缘卷曲后，立即加入含血清培养基终止消化
5. 注意事项
- 避免消化时间过长（防止干细胞标志物丢失）
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶，确保贴壁稳定性
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+海藻糖保护剂）
2. 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 消化收集细胞后离心，重悬于预冷冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
4. 复苏验证
- 复苏后24小时存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：通过成脂/成骨分化实验检测多向分化潜能（P5代内需保持分化能力）
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录证明）
- 3个工作日内证实细菌或真菌污染（需提供污染检测图像）
- 复苏后细胞存活率低于90%（需提供台盼蓝染色结果）
- 干细胞表面标志物（如CD90/CD105）表达不符合标准
2. 不予重发情形
- 收货后超过72小时未进行复苏操作
- 使用非推荐培养基或未更换包被基质
- 未按规范进行细胞传代导致分化异常
- 未留存冻存备份导致实验中断
