一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠宫颈上皮细胞(Rat Cervical Epithelial Cells)
细胞别称:RCEC;宫颈上皮细胞;宫颈上皮原代细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年雌性大鼠(供体无生殖系统疾病史)
组织来源:宫颈组织(经机械分离与酶消化法提取)
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:单层铺展呈多边形,接触抑制后呈现典型铺路石样排列
细胞代数:P3 - P8(推荐使用前5代以维持上皮特性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Epithelial Cell Medium(含5% FBS+上皮细胞生长因子+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约48 - 60小时(依赖培养密度及传代处理)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时适应环境
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每3天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(建议初始接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液(含0.02% EDTA)
- 37℃消化30秒 - 1分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项:
- 消化后需完全中和胰酶(残留酶易导致细胞脱落)
- 传代后12小时更换培养基以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90%基础培养基)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心后重悬细胞于预冷冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证:
- 复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:免疫荧光检测角蛋白18表达(P3代细胞阳性率需>95%)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度记录异常(需提供物流温度监控截图)
2. 到货48小时内经PCR证实支原体污染
3. 复苏后细胞贴壁率低于80%(需提供培养24小时显微照片)
4. 细胞种属鉴定与大鼠STR数据库不匹配
不予重发情形:
1. 未按规范进行胶原包被导致细胞贴壁失败
2. 自行更换培养基引发细胞形态异常
3. 冻存管脱离液氮存储超过5分钟
4. 未进行细胞功能验证直接用于下游实验