大鼠宫颈上皮细胞

大鼠原代细胞

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XM-X02605×10^5大鼠原代细胞4250


一、细胞基本属性

细胞名称:大鼠宫颈上皮细胞(Rat Cervical Epithelial Cells)

细胞别称:RCEC;宫颈上皮细胞;宫颈上皮原代细胞

种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)

年龄性别:健康成年雌性大鼠(供体无生殖系统疾病史)

组织来源:宫颈组织(经机械分离与酶消化法提取)

生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)

细胞形态:单层铺展呈多边形,接触抑制后呈现典型铺路石样排列

细胞代数:P3 - P8(推荐使用前5代以维持上皮特性)

细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)

培养基:Epithelial Cell Medium(含5% FBS+上皮细胞生长因子+1%双抗)

培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%

冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存

倍增时间:约48 - 60小时(依赖培养密度及传代处理)

供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物生产


二、细胞培养操作指南

收货处理:

- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀

- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时适应环境

传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每3天传代一次)

传代比例:1:2至1:3(建议初始接种密度4×10³ cells/cm²)

消化方法:

- 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液(含0.02% EDTA)

- 37℃消化30秒 - 1分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止

注意事项:

- 消化后需完全中和胰酶(残留酶易导致细胞脱落)

- 传代后12小时更换培养基以促进贴壁


三、细胞冻存操作规范

冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90%基础培养基)

细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL

冻存步骤:

- 离心后重悬细胞于预冷冻存液,分装至冻存管

- 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮储存

复苏验证:

- 复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法)

- 功能验证:免疫荧光检测角蛋白18表达(P3代细胞阳性率需>95%)


四、售后服务承诺

重发标准:

1. 运输过程温度记录异常(需提供物流温度监控截图)

2. 到货48小时内经PCR证实支原体污染

3. 复苏后细胞贴壁率低于80%(需提供培养24小时显微照片)

4. 细胞种属鉴定与大鼠STR数据库不匹配

不予重发情形:

1. 未按规范进行胶原包被导致细胞贴壁失败

2. 自行更换培养基引发细胞形态异常

3. 冻存管脱离液氮存储超过5分钟

4. 未进行细胞功能验证直接用于下游实验