一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠海绵体内皮细胞（Rat Corpus Cavernosum Endothelial Cells）
- 细胞别称：RCCEC；海绵体微血管内皮细胞；阴茎海绵体内皮细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无生殖系统疾病史）
- 组织来源：阴茎海绵体组织微血管段
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被）
- 细胞形态：典型单层铺路石样排列，接触抑制后呈现扁平多角形
- 细胞代数：P3 - P8（确保内皮标志物高表达及功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：大鼠内皮细胞专用培养基（含5% FBS + 内皮细胞生长因子及肝素添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~36 - 60小时（与细胞密度及培养基批次相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物体内移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒表面后静置于培养箱2小时适应环境
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含0.02%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：
- 消化终止后需轻柔吹打以避免细胞碎片
- 传代后12小时内避免频繁观察以降低机械扰动
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，缓慢逐滴加入冻存液混匀
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：CD31免疫荧光染色及乙酰化低密度脂蛋白摄取实验
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内经PCR证实支原体污染
- 细胞复苏后贴壁率低于80%
- 标志物表达与说明书不符（需提供流式检测数据）
- 不予重发情形：
- 未按说明书要求进行基质包被导致细胞脱落
- 使用非推荐消化酶（如高浓度胰酶）引发细胞损伤
- 未定期进行支原体检测造成实验室污染
- 液氮保存设备故障导致的细胞失活
（注：以上操作均需在二级生物安全柜内完成，实验废弃物按生物危害性物质规范处理。）
