一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠卵泡膜细胞（Rat Ovarian Theca Cells）
- 细胞别称：卵泡膜间质细胞；卵巢膜细胞；Theca Cells
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年雌性大鼠（供体筛选无生殖系统疾病史）
- 组织来源：卵巢卵泡膜组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原基质包被培养器皿）
- 细胞形态：梭形或多边形，贴壁后呈现典型间质细胞特征
- 细胞代数：P2 - P6（推荐使用代数，确保激素分泌功能稳定）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12基础培养基（含10% FBS + 1%双抗+胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含8% DMSO及细胞膜稳定剂），液氮长期保存
- 倍增时间：~60 - 72小时（受激素刺激条件影响显著）
- 供应限制：仅限体外研究使用，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻后转移至含5mL培养基的离心管，800rpm离心3分钟，弃上清重悬接种
- 培养瓶：表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡1小时，次日首次换液
- 传代标准：融合度达80% - 90%（高密度可能诱导自发黄体化）
- 传代比例：1:2至1:3（建议使用胶原酶消化替代胰酶）
- 消化方法：0.1% IV型胶原酶消化15 - 20分钟，37℃震荡辅助解离，离心去除酶液
- 注意事项：
- 避免频繁传代（超过P6代可能丧失LH受体表达能力）
- 培养时需添加适量雄烯二酮前体物质维持功能
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清专用冻存液（含8% DMSO + 20% FBS+葡萄糖缓冲体系）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化后细胞悬液离心去上清，缓慢滴加预冷冻存液
- 程序降温：4℃平衡30分钟后转入程序冷冻盒，-80℃过夜后转液氮
- 复苏验证：
- 复苏存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：P3代细胞需通过ELISA检测孕酮基础分泌量（＞10ng/10⁶ cells/24h）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 液氮运输罐温度记录异常（需提供物流温度监控证明）
- 到货72小时内PCR检测证实支原体污染
- 复苏后活率低于80%（需提供染色检测视频）
- 物种鉴定与大鼠来源不符
- 不予重发情形：
- 未使用胶原包被培养皿导致贴壁失败
- 自行添加高浓度激素改变细胞特性
- 培养超过推荐代数（P6）后功能异常
- 未按规程进行传代消化造成细胞团块损伤
（注：所有操作需遵守Ⅱ级生物安全规范，细胞特性可能因个体差异存在批次间波动）
