一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠子宫成纤维细胞(Rat Uterine Fibroblasts)
- 细胞别称:RUF;子宫基质细胞;子宫成纤维样细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年雌鼠(供体筛选无生殖系统疾病史)
- 组织来源:子宫组织(取自子宫肌层或内膜层)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被)
- 细胞形态:典型长梭形或星状多突,单层贴壁后呈不规则三角形
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能活性与遗传稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12(含10% FBS + 1%双抗+成纤维细胞生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂+ 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(与血清浓度及培养密度相关)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或动物繁育
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱2小时适应环境
- 传代标准:细胞融合度达90% - 95%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:4(推荐初始密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍培养瓶促使细胞脱落
- 注意事项:
- 消化终止时加入含血清培养基中和酶活性
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心后弃上清,轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟→ -20℃ 2小时→ -80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证:
- 复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P5代细胞应维持典型成纤维细胞表型)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供冻存管状态证明)
- 7日内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
- 细胞贴壁率低于80%(接种后24小时评估)
- 种属鉴定与大鼠STR分型不符
- 不予重发情形:
- 客户未按推荐培养基培养导致功能异常
- 解冻后存放超过48小时未接种
- 自行更改冻存条件或反复冻融
- 未进行污染检测直接用于共培养实验