一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠睾丸间质细胞（Rat Testicular Leydig Cells）
- 细胞别称：Leydig细胞；睾丸间质细胞；睾丸间质细胞系
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年雄性大鼠（供体筛选无生殖系统疾病史）
- 组织来源：睾丸间质组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：多角形或星形，单层贴壁后呈簇状分布
- 细胞代数：P3 - P8（维持激素分泌功能及遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Leydig细胞专用培养基（含5% FBS + 生长因子复合物）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 72小时（与激素刺激条件相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物繁育实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面后静置培养箱4小时平衡
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每4 - 5天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：
- 消化后需立即加入含血清培养基终止反应
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及糖原保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心后重悬细胞于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：睾酮分泌检测（P5代细胞应保持基础激素分泌能力）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 5天内证实支原体/真菌污染（需提供荧光定量PCR报告）
- 细胞贴壁率低于80%（需提供接种后48小时显微图像）
- 物种鉴定与描述不符（STR检测结果异常）
- 不予重发情形：
- 未按规范预包被培养器皿导致细胞贴壁失败
- 自行更换培养基或添加剂引发功能异常
- 冻存管未经梯度降温直接投入液氮
- 未进行无菌操作导致污染
