一、细胞基本属性
1. 细胞名称：大鼠乳腺成纤维细胞（Rat Mammary Fibroblasts），细胞别称：RMF；乳腺基质细胞；乳腺成纤维样细胞。
2. 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）。
3. 年龄性别：健康成年雌性（供体筛选无乳腺疾病史）。
4. 组织来源：乳腺组织基质层。
5. 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）。
6. 细胞形态：长梭形或星状，单层贴壁呈放射状排列。
7. 细胞代数：P3 - P8（经STR鉴定确认遗传稳定性）。
8. 细胞规格：5×10⁵ cells/T25培养瓶或1.5mL冻存管（含专用冻存液）。
9. 培养基：DMEM/F12+10% FBS+1%青霉素 - 链霉素+2mM L-谷氨酰胺。
10. 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%。
11. 冻存条件：无血清冻存液（含8% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存。
12. 倍增时间：约36 - 48小时（与血清批次及培养密度相关）。
13. 供应限制：仅用于体外科研实验，禁止临床应用或转基因操作。
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理：
- 冻存管需37℃水浴快速复苏，离心去除冻存液后重悬于预热培养基。
- 培养瓶经表面消毒后静置于培养箱平衡4小时再更换新鲜培养基。
2. 传代标准：融合度达90% - 95%时传代（建议每2 - 3天观察一次）。
3. 传代比例：1:3至1:4分瓶（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）。
4. 消化方法：采用0.25%胰酶 - EDTA溶液，37℃消化2 - 3分钟，终止时加入等体积含血清培养基。
5. 注意事项：
- 传代后需间隔48小时再进行实验操作以确保细胞状态稳定。
- 定期检测支原体污染（建议每3代检测一次）。
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方：无血清冻存液（含8% DMSO+20% FBS+葡萄糖稳定剂）。
2. 冻存密度：5×10⁶至1×10⁷ cells/mL（离心后细胞沉淀量需达80%以上）。
3. 冻存程序：梯度降温采用程序降温盒：4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存。
4. 质量验证：
- 复苏存活率≥85%（台盼蓝染色法）。
- 功能验证包括胶原分泌量检测（第三代细胞应保持正常分泌功能）。
四、售后服务承诺
1. 重发保障：
- 到货72小时内提供温度记录异常证明（物流测温仪数据）。
- 细胞污染经第三方检测机构确认（限收到后5个工作日内反馈）。
- 细胞活性低于85%并提供染色检测视频。
- 种属鉴定结果不符（STR检测报告比对）。
2. 免责条款：
- 客户自行修改培养基成分导致细胞异常。
- 未按规定使用原代细胞专用培养耗材。
- 超时培养导致细胞老化（超过推荐传代代数）。
- 未按要求进行定期污染检测引发的实验问题。
