一、细胞基本属性
1. 细胞名称:大鼠卵巢表面上皮细胞(Rat Ovarian Surface Epithelial Cells),别称ROSE细胞、卵巢上皮细胞。
2. 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus),健康成年雌性大鼠(无生殖系统疾病史)。
3. 组织来源:卵巢表面单层上皮组织。
4. 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)。
5. 细胞形态:单层铺路石样,融合后呈多边形紧密排列。
6. 细胞代数:P3 - P6(推荐使用代数以确保功能稳定性)。
7. 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)。
8. 培养基:上皮细胞专用培养基(含5% FBS+上皮生长因子+胰岛素添加剂)。
9. 培养条件:气相为5% CO₂ + 95%空气,温度37℃,湿度95%。
10. 冻存条件:无动物源成分冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存。
11. 倍增时间:约36 - 48小时(与培养基批次及接种密度相关)。
12. 供应限制:仅用于基础科研,禁止临床或工业用途。
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后转移至含5mL培养基的离心管,离心去冻存液后重悬接种。
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱4小时待细胞贴壁后更换新鲜培养基。
2. 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)。
3. 传代比例:1:2至1:3(推荐初始密度3×10³ cells/cm²)。
4. 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶辅助消化)。
- 37℃消化3 - 5分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后轻柔拍打分散。
5. 注意事项:
- 消化终止需使用含血清的终止液。
- 首次传代后48小时内避免频繁移动培养器皿。
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO+海藻糖保护剂)。
2. 细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL。
3. 冻存步骤:
- 离心收集细胞后缓慢滴加冻存液混匀。
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 1小时→ - 80℃ 12小时→液氮储存。
4. 复苏验证:
- 复苏后48小时进行活率检测(台盼蓝染色存活率≥90%)。
- 功能验证:细胞角蛋白18免疫荧光染色(P4代细胞应维持上皮标志物表达)。
四、售后服务承诺
1. 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞团块化(需提供物流温度记录)。
- 到货7天内验证存在微生物污染(需提供第三方检测报告)。
- 细胞贴壁率低于80%(需提供接种24小时显微照片)。
- 种属鉴定结果与描述不符。
2. 不予重发情形:
- 解冻后未按规范进行离心去冻存液操作。
- 使用非胶原包被培养器皿导致贴壁失败。
- 传代时机械刮取替代酶消化法。
- 未定期进行支原体检测引发交叉污染。
(注:本产品需配合专用包被试剂盒使用,实验前请详阅操作手册)