一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠子宫平滑肌细胞(Rat Uterine Smooth Muscle Cells)
- 细胞别称:RUSMC;子宫平滑肌细胞;子宫肌层细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年雌性大鼠(供体筛选无生殖系统疾病史)
- 组织来源:子宫平滑肌组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质及特定生长因子)
- 细胞形态:长梭形或纺锤形,平行排列呈束状,接触抑制后呈典型“峰谷”结构
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能活性与表型稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Smooth Muscle Cell Medium(含5% FBS+平滑肌细胞生长添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养密度及生长因子浓度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面后,静置培养箱2小时平衡温湿度。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每4 - 5天传代一次)。
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)。
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺缓冲液)。
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞间隙增大后立即终止。
- 注意事项:
- 避免过度消化(保护细胞膜表面受体完整性)。
- 传代后12 - 24小时内避免频繁移动培养瓶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂)。
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液。
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证:
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(≥90%为合格)。
- 功能验证:钙离子荧光探针检测收缩功能(P5代细胞应维持基础收缩响应)。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)。
- 收到后3天内证实支原体或细菌污染(需提供检测报告)。
- 细胞复苏存活率低于90%(台盼蓝染色法)。
- 细胞标志物检测与描述不符(需提供α - SMA免疫荧光结果)。
- 不予重发情形:
- 客户延迟复苏超过48小时。
- 使用非推荐培养基导致细胞形态异常。
- 未按规范进行传代导致细胞老化。
- 未执行建议的污染检测直接进行实验。