一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠输卵管平滑肌细胞(Rat Oviduct Smooth Muscle Cells)
- 细胞别称:输卵管SMC;输卵管肌细胞;输卵管平滑肌细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年雌性大鼠(供体筛选无生殖系统疾病史)
- 组织来源:输卵管组织平滑肌层
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤连蛋白包被)
- 细胞形态:典型长梭形或纺锤形,可呈现平行排列的束状结构
- 细胞代数:P3 - P6(保证收缩功能及标志物表达稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:平滑肌细胞专用培养基(含5% FBS+胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒添加剂)
- 培养条件:气相:5%CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), -150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(受细胞密度及培养基批次影响)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精擦拭外壁后静置于培养箱中平衡1 - 2小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每4 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐初始接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用溶液:0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.02%胶原酶)
- 操作条件:37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止反应
- 注意事项
- 避免剧烈吹打(保护细胞骨架完整性)
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟→ -20℃ 2小时→ -80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后24小时存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P4代细胞应保持标志物高表达)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程中温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 7天内证实支原体污染(需提供荧光定量PCR检测结果)
- 细胞贴壁率低于80%(接种后24小时显微观察评估)
- 标志物检测与描述不符(需提供第三方检测报告)
- 不予重发情形
- 解冻后未在48小时内接种
- 使用非指定培养基或血清批次
- 未按规范进行胶原酶辅助消化导致细胞损伤
- 未定期检测支原体导致实验数据异常