一、细胞基本属性
细胞名称：大鼠卵巢间质细胞（Rat Ovarian Stromal Cells）
细胞别称：ROSC；卵巢基质细胞；卵巢间质成纤维细胞
种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无生殖系统疾病史）
组织来源：卵巢间质组织（经机械分离与胶原酶消化纯化）
生长特性：贴壁生长（依赖纤维连接蛋白包被培养器皿）
细胞形态：典型成纤维细胞样梭形，单层生长时呈放射状排列
细胞代数：P3 - P8（确保内分泌功能与增殖活性稳定）
细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：DMEM/F12培养基（含10%胎牛血清 + 1%双抗 + 5ng/mL碱性成纤维细胞生长因子）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含8% DMSO及海藻糖保护剂），液氮气相长期保存
倍增时间：约48 - 60小时（与激素刺激条件相关）
供应限制：仅用于基础研究，禁止用于人类疾病治疗或转基因动物培育
二、细胞培养操作指南
收货处理：
冻存管：37℃水浴轻柔摇晃解冻，加入3mL预温培养基低速离心去冻存液
培养瓶：酒精消毒外壁后静置培养箱4小时，待细胞贴壁后首次换液
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每周传代1 - 2次）
传代比例：1:2至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法：
使用0.25%胰酶 - 0.02% EDTA混合消化液
37℃消化3 - 5分钟，离心后轻柔吹打成单细胞悬液
注意事项：
消化全程需避光操作（保护光敏感生长因子）
传代后48小时内避免频繁观察扰动细胞贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含8% DMSO + 10%海藻糖 + 基础培养基）
细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
预冷冻存管至4℃，细胞悬液分装后立即进行程序降温
梯度降温：4℃ 30分钟 → - 20℃ 1小时 → - 80℃ 12小时 → 液氮储存
复苏验证：
复苏后48小时检测活性（活率≥85%为合格标准）
功能验证：孕酮分泌检测（P5代细胞应维持基础激素分泌能力）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 干冰运输超时导致细胞失活（需提供物流温度记录凭证）
2. 到货7日内经ELISA检测证实支原体污染
3. 细胞贴壁率低于80%（需提供接种后24小时显微照片）
4. 物种鉴定结果与标识不符（STR检测报告为证）
不予重发情形：
1. 未使用原代配套培养基导致功能异常
2. 自行添加激素未按推荐浓度梯度
3. 超量接种引发接触抑制失效
4. 未执行标准复苏流程直接进行实验操作
（注：所有操作需符合实验动物伦理规范，建议在二级生物安全柜内完成细胞处理）
