一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠卵巢颗粒细胞(Rat Ovarian Granulosa Cells)
- 细胞别称:卵巢颗粒细胞;卵泡颗粒细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康雌性大鼠(性成熟期,无生殖系统疾病史)
- 组织来源:卵巢卵泡颗粒细胞层
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质及激素环境)
- 细胞形态:多角形或梭形,贴壁后呈单层铺展,核质比适中
- 细胞代数:P3 - P6(确保内分泌功能与基因表达稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12基础培养基(含10% FBS+1%双抗+激素添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约48 - 72小时(受激素浓度及培养密度影响)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物繁育
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱平衡1小时后换液
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项
- 消化后需完全中和酶活性(推荐含血清培养基终止)
- 避免频繁换液(激素敏感性高,建议维持培养基稳定性)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及糖原保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:雌激素分泌检测(P4代细胞应维持基础激素合成能力)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 1.运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供全程温控记录)
- 2.72小时内证实微生物污染(需提供污染检测报告)
- 3.细胞复苏存活率低于90%(需提供台盼蓝染色图像)
- 4.种属鉴定与描述不符(需提供STR比对结果)
- 不予重发情形
- 1.收货后超72小时未按规范复苏
- 2.自行更改培养基成分导致细胞功能异常
- 3.未按推荐条件进行激素诱导实验
- 4.未执行无菌操作引发交叉污染
(注:本产品需配合激素诱导方案使用,具体实验设计建议咨询技术支持。)