一、细胞基本属性
细胞名称
大鼠睾丸支持细胞（Rat Testicular Sertoli Cells）
细胞别称
Sertoli细胞；睾丸滋养细胞；生精小管支持细胞
种属来源
大鼠（Rattus norvegicus）
年龄性别
健康雄性成年大鼠（供体筛选无生殖系统疾病史）
组织来源
睾丸组织曲细精管段
生长特性
贴壁生长（需胶原蛋白或层粘连蛋白包被培养器皿）
细胞形态
不规则多边形或梭形，具备典型支持细胞特征（胞体大、核仁明显）
细胞代数
P3 - P8（确保细胞功能稳定性与代谢活性）
细胞规格
5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
DMEM/F12（含10% FBS+2mM L - 谷氨酰胺+1%非必需氨基酸+10ng/mL FSH）
培养条件
气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
倍增时间
约72 - 96小时（依赖培养基成分与细胞密度）
供应限制
仅限科研用途，不可用于临床治疗或动物繁育
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
传代标准
细胞融合度达80% - 90%（推荐每4 - 5天传代一次）
传代比例
1:2至1:3（建议接种密度1×10⁴ cells/cm²）
消化方法
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA（含0.1%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍培养瓶至细胞层脱落
注意事项
- 消化后需轻柔吹打避免细胞团块残留
- 首次换液应在传代后48小时内完成
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO+20%胎牛血清）
细胞密度
冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤
- 细胞悬液与冻存液按1:1混合
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → - 20℃ 4小时 → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证
- 复苏后48小时检测存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：免疫荧光染色鉴定波形蛋白（Vimentin）表达
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
2. 7日内证实支原体污染（需提供检测报告）
3. 细胞贴壁率低于80%（接种后72小时评估）
4. 物种鉴定与描述不符
不予重发情形
1. 客户未按推荐条件进行原代培养
2. 使用非激素添加剂导致细胞功能异常
3. 冻存管未经梯度降温直接投入液氮
4. 未提供污染检测证明即进行共培养实验
