一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠甲状旁腺细胞(Rat Parathyroid Cells)
细胞别称:RPTC;甲状旁腺主细胞;甲状旁腺实质细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别可选,供体经筛选排除内分泌疾病史)
组织来源:甲状旁腺组织(经胶原酶消化法分离)
生长特性:贴壁生长(需胶原包被培养器皿)
细胞形态:单层多角形或立方状,细胞间紧密连接
细胞代数:P2 - P6(维持钙离子敏感性与激素分泌功能)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:甲状旁腺专用培养基(含10% FBS+钙离子调节因子+生长因子添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:约72 - 96小时(受培养基钙浓度及细胞活性影响)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻后,离心去除冻存液,加入5mL预热培养基重悬
培养瓶:75%酒精表面消毒后直接置于培养箱平衡1小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐传代周期5 - 7天)
传代比例:1:2至1:3(建议接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含1mM Ca²⁺),37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落,立即加入含血清培养基终止
注意事项:
消化过程需严格计时,避免细胞膜完整性受损
传代后48小时内监测甲状旁腺激素(PTH)分泌基线
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含12% DMSO及营养保护剂)
细胞密度:冻存浓度:8×10⁵ - 1.2×10⁶ cells/mL
冻存步骤:离心收集细胞后缓慢滴加冻存液混匀,程序降温:4℃平衡30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证:复苏后48小时进行活率检测(台盼蓝拒染率≥90%),功能验证:钙离子刺激试验(P3代细胞应保持PTH分泌响应性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流温度记录异常导致细胞失活(需提供运输温度曲线)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞贴壁率低于80%(需提供显微观察记录)
4. 物种鉴定结果与描述不符
不予重发情形:
1. 解冻后未在48小时内启动培养
2. 擅自修改培养基配方导致功能异常
3. 未按规范进行钙离子浓度调控实验
4. 未使用胶原包被培养器皿引发细胞脱落